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如何防止HPLC或CapLC的污染



减少或减少背景污染物的建议:所有溶剂和酸,碱,缓冲盐都是化学品,其中没有一种是100%纯的。因此,LC/MS中总有一些化学背景。为了提高数据质量,值得考虑将干扰和背景噪声降至最低。在这里,我们为您提供一些小建议供您参考。同时,您也可以提供您的工作经验和技巧,以便更多用户分享!

溶剂和添加剂:

一个。使用最高纯度试剂—— HPLC级或更高纯度。

一世。最好使用Fisher Optima等级

1.一些HPLC级试剂含有聚乙二醇(PEG)化合物。紫外检测器无法检测到它们的存在。

一些HPLC级试剂含有铁离子(Fe 3)。

二。水可能是污染物的主要来源

3.必须保持在线纯净水系统(Milli-Q)。 18毫欧姆的水不完全没有有机污染物。

4.瓶装水不一定比Milli-Q的水好,因为它可能会在打开瓶装水后积聚污染物。

5.不建议将水储存在塑料容器中。

6.通过将水通过干净的C18柱进一步净化水以除去有机物质,可通过高压二元梯度和C18保护柱在线进行。

湾诸如乙酸的添加剂可能含有大量的铁。 100 ppb听起来浓度非常低,但100 ppb=100 ng/L或100 pg/mL。

一世。由乙酸形成的铁的加合物导致强的ESI质谱。

二。已显示甲酸含有较少的铁离子。

C。添加最低浓度的添加剂可以降低化学背景噪音,提高信噪比和灵敏度。

2.样品和溶剂的容器

一个。瓶盖,样品提取板:

i.Waters样品瓶是质量控制的,其他品牌可能不那么干净。

二。由于存在塑料或粘合剂,带有垫圈的瓶盖可能污染自动进样器。三。样品提取板由塑料制成,并且可以通过增塑剂(例如邻苯二甲酸二辛酯)释放。

四。粘贴到金属箔上的样品提取板的盖子可能具有粘合材料的损失。

湾玻璃器皿

一世。用普通洗涤剂洗涤后,玻璃器皿上可能存在洗涤剂残留物(聚乙二醇化合物)和其他“粘性”物质。

二。用要使用的流动相质量的试剂冲洗。

C。塑料容器或管道:

不要在增塑剂中储存溶剂或水(因为它们就像邻苯二甲酸二辛酯污染物??)。

3.护手霜

d。含有聚乙二醇化合物,油,维生素等。

即处理可接触流动相或样品的HPLC部件时戴上手套。

4.样品和样品基质

F。样品基质可含有盐和其他不需要的物质。在制备针头清洁溶液时,必须考虑基质的溶解度。

一世。无机盐不溶于高有机比的溶液,避免使用含有Na,K,PO4-3的缓冲液,因为它们是非挥发性的。含有NH 4乙酸盐或甲酸的缓冲剂是挥发性的并且与MS相容。

二。高有机相溶液中的蛋白质(例如在组织,血液或血清样品中)(>

40%)将沉淀,沉淀的蛋白质将阻塞注射器和管道,并将吸附分析物或污染物。

G。用于制备样品的化学品(例如,洗涤剂,盐)等可产生大量不需要的离子。样品的纯化和富集方式需要与LC/MS协调。

H。分析物的溶解度可能是个问题。如果样品不溶于高有机相溶液,则一些分析物可能在流动相中沉淀,注入初始低有机溶剂并污染进样器或色谱柱,然后进入下一个梯度。它们可能会再次溶解。

一世。注射时浓度非常高的样品可能会污染进样器。当观察样品中0.1%的杂质时,可能会出现这种情况,因为需要注入足够的样品才能观察。5.专栏

学家该列可以像过滤器一样运行。颗粒,沉淀的蛋白质等都留在柱头上并缓慢冲洗,这逐渐增加了背景离子。

?。 C18分析柱或Traping脱盐柱将从水中捕获疏水化合物并慢慢富集它们。

一世。当用富集的化合物洗脱时,它可能在整个色谱图中显示为独特的峰或类似的拖尾模式。

二。痕量富集可导致来自溶剂或HPLC系统的污染物量的增加。

三。长期平衡C18色谱柱将富集更多污染物。

四。用具有低有机相浓度的等度流动相冲洗柱也将富??集污染物。应使用高有机相溶液定期清洗色谱柱。

6.PEEK管和石英毛细管

j.PEEK是一种塑料聚合物。许多疏水化合物(如类固醇)可能会吸附在它们上面,当它们洗脱时,它们会形成污染物。

?。石英毛细管路径具有反应离子的表面,并且某些物质(例如一些蛋白质和肽)粘附到石英上。粘附在玻璃表面的任何物质都会附着在石英毛细管上。当它们被洗脱时,它们将形成污染物。

7. HPLC系统 - 使用前清洁并测试污染物(参见“37相液相色谱通信中系统的清洗和钝化”)

摘自:中国分析测量网络

[关键词] HPLC,CapLC,污染,奥克官方网站

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下一步:正确使用和维护pH计

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